龙眼pri-miR319a编码短肽活性的研究

• 作者: 苏立遥 王培育 蒋梦琦 黄倏祺 薛晓东 刘梦雨 肖学宸 赖春旺 张梓浩 陈裕坤 赖钟雄 林玉玲
• 来源期刊: 园艺学报
• 关键词: 龙眼 miR319a miRNA编码短肽 基因克隆 遗传转化
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research Papers
• 页码范围: 908-920
• 页数: 13页
• 分类号: S667.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2020-0579

摘要

为研究龙眼miRNA编码短肽(miRNA encode regulatory peptide,miPEP)的潜在活性,以miR319为对象,从7个龙眼品种中克隆得到pri-miR319a序列并预测其潜在编码miPEP,并通过遗传转化和人工合成miPEP的方法验证miPEP319a的活性.结果 显示,7个龙眼品种中pri-miR319a序列存在10个核苷酸的差异,并具有3个潜在ORF可以编码miPEP,其中1个核苷酸突变位点导致miPEP319a氨基酸序列的改变.进一步通过原位转化法获得转化miPEP的过表达载体及相应突变表达载体的龙眼幼芽,并结合人工合成miPEP319处理龙眼胚性愈伤组织,进一步验证龙眼miPEP的生物学活性.结果 显示,pri-miR319a编码的3个潜在miPEP仅miPEP319a-2具有生物学活性并促进下游miR319a的表达.最后采用烟草叶片的瞬时转化法验证龙眼miPEP319a在烟草当中的活性及对miR319a的影响.结果 表明龙眼miPEP319a具有物种特异性,在烟草叶片中miR319a的表达模式无差异.该研究结果提示龙眼pri-miR319序列在不同品种中具有多态性,且其编码的3个潜在miPEP仅miPEP319a-2具有生物学活性,并具有物种特异性,同时也暗示龙眼miPEP319a-2可以参与到龙眼的生长发育过程中.