人源3-巯基丙酮酸转移酶抑制剂的发现和作用机制研究

• 作者: 杨蓉 周越洋 吴方
• 来源期刊: 生物技术
• 关键词: hMST H2S NO 抑制剂 药物筛选
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著|Research Paper
• 页码范围: 224-232
• 页数: 9页
• 分类号: R963
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2021.03.0035

摘要

[目的]旨在发现硫化氢产生酶—人源3-巯基丙酮酸转移酶(hMST)—的新型抑制剂并研究其作用的分子机制.[方法]利用点突变克隆了hMST的突变体,建立了hMST野生型和突变体的原核表达和纯化方法.基于192串联双孔板法,建立了hMST的高通量抑制剂筛选方法,并筛选得到1类NO供体抑制剂.利用改进的"双孔板"方法,进行了NO供体抑制剂的分子机制研究.[结果]经过原核表达和纯化,成功得到具有酶活性的hMST野生型和Cys突变体,并建立了其高通量抑制剂筛选方法.发现NO供体硝普钠SNP可以对野生型酶和突变体酶都具有抑制效果,并且这种抑制效果能够被二硫键还原剂—二硫苏糖醇—部分回复.[结论]发现了一种新型的hMST抑制剂—硝普钠,其IC50值为4.1 mmol/L,发现其能够通过共价修饰hMST的酶活力位点的Cys248残基,达到对酶活性的抑制效果.