Raji-MG63细胞共培养体系中心肌营养蛋白样细胞因子1(CLCF1)对RANKL/OPG比值及成骨细胞分化的影响

• 作者: 陈娟 叶云金 谢丽华 陈赛楠 葛继荣 许惠娟
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CLCF1 RANKL/OPG JAK2/STAT3通路 成骨分化 骨免疫
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 157-161
• 页数: 5页
• 分类号: R681
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨Raji-MG63细胞共培养体系中,心肌营养蛋白样细胞因子1(cardiotrophin-like cytokine factor 1,CLCF1)基因对骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和成骨细胞分化的影响.方法 通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建CLCF1基因敲除Raji细胞系,实验分2组:对照组(Control组)和CLCF1敲除组(CLCF1-KO组).应用Transwell技术建立Raji-MG63细胞共培养体系,通过蛋白质印迹法(western blot,WB)检测CLCF1、OPG、RANKL及JAK2/STAT3蛋白的变化.运用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和茜素红染色观察成骨细胞分化能力.结果 WB结果显示,与对照组比较,CLCF1敲除组OPG(P<0.01)蛋白明显下调,RANKL/OPG比值升高(P<0.001),磷酸化JAK2(P<0.001)和STAT3(P<0.01)蛋白明显下调,差异具有统计学意义;ALP活性检测和茜素红染色结果显示,Raji-MG63细胞共培养体系中,CLCF1敲除组MG63细胞ALP活性和矿化形成能力降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.001).结论 CLCF1基因能通过调控RANKL/OPG比值和JAK2/STAT3通路影响成骨细胞分化.