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恩替卡韦耐药乙型肝炎病毒稳定复制细胞系的转录组学分析
恩替卡韦耐药乙型肝炎病毒稳定复制细胞系的转录组学分析
作者:
张孝璐
杨兰
孙岩松
徐东平
李晓峰
刘妍
李浩
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
乙型肝炎病毒
DNA修复
计算生物学
转录组测序
恩替卡韦
HepG2.A64细胞系
摘要:
目的 分析恩替卡韦耐药乙型肝炎病毒(ETV-r HBV)稳定转染前后宿主细胞转录组水平的基因差异表达,为后续开展HBV感染相关机制研究提供基础数据和参考.方法 对ETV-r HBV稳定转染细胞株(HepG2.A64)及其原始背景细胞株(HepG2)进行转录组测序(n=3),利用DESeq2软件以|log2 Fold Change|>2、padj<0.05为差异基因筛选条件对测序结果进行差异基因筛选;利用clusterProfiler软件对差异基因进行GO功能富集分析和KEGG功能富集分析.采用RT-qPCR及Western blotting分别检测HBV稳定转染前后宿主细胞DNA修复相关基因mRNA及蛋白的表达水平.结果 转录组测序结果显示,与HepG2细胞系相比,ETV-r HBV稳定转染的HepG2.A64细胞系共有613个基因存在差异表达,其中401个上调,212个下调(padj<0.05),GO和KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要参与炎症反应、PI3K/Akt信号通路、PPAR信号通路、NF-κB信号通路以及免疫相关的生物学过程.RT-qPCR及Western blotting检测结果显示,与HepG2细胞系相比,HepG2.A64细胞系中RAD52和XRCC2 mRNA表达量分别下降68.96%±7.59%、69.58%±6.32%,RAD52和XRCC2蛋白表达量分别下降69.93%±3.88%、26.47%±12.7%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 与原始细胞系HepG2相比,ETV-r HBV稳定转染的HepG2.A64细胞系在转录水平出现大量差异表达基因,同时HepG2.A64细胞系中DNA修复相关基因表达量出现下调.
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文献信息
篇名
恩替卡韦耐药乙型肝炎病毒稳定复制细胞系的转录组学分析
来源期刊
解放军医学杂志
学科
关键词
乙型肝炎病毒
DNA修复
计算生物学
转录组测序
恩替卡韦
HepG2.A64细胞系
年,卷(期)
2021,(5)
所属期刊栏目
基础研究|Basic Research
研究方向
页码范围
448-455
页数
8页
分类号
R373
字数
语种
中文
DOI
10.11855/j.issn.0577-7402.2021.05.04
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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(/年)
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引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
乙型肝炎病毒
DNA修复
计算生物学
转录组测序
恩替卡韦
HepG2.A64细胞系
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
解放军医学杂志
主办单位:
人民军医出版社
出版周期:
月刊
ISSN:
0577-7402
CN:
11-1056/R
开本:
大16开
出版地:
北京100036信箱188分箱
邮发代号:
2-74
创刊时间:
1964
语种:
chi
出版文献量(篇)
8116
总下载数(次)
11
总被引数(次)
57068
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