重组酶快速检测十足目虹彩病毒1方法的建立

• 作者: 尹伟力 吴葳 刘晓静 马晓玲 韩伟 吴宁宁 陈燕平
• 来源期刊: 水产科学
• 关键词: 十足目虹彩病毒1 重组酶聚合酶扩增技术 快速检测
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与应用|Research and Application
• 页码范围: 267-272
• 页数: 6页
• 分类号: S948
• 语种: 中文
• DOI: 10.16378/j.cnki.1003-1111.19235

摘要

为建立十足目虹彩病毒1的快速检测方法,根据十足目虹彩病毒1的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的十足目虹彩病毒1检测方法.重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30℃,恒温反应20 min内即可完成.特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应.敏感性试验结果显示,该方法对十足目虹彩病毒1的最低检出限为7拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法.利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于临床检测.笔者建立的检测十足目虹彩病毒1的重组酶聚合酶扩增技术具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现场检测.