多重PCR联合毛细管电泳技术检测碳青霉烯酶基因

• 作者: 孙宁 于娟 余柏增 陈勇 曹进 黄红娟 王卫萍 张立平 李晓军
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 关键词: 碳青霉烯酶基因 多重PCR 毛细管电泳
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 340-345
• 页数: 6页
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2021.05.05

摘要

目的 建立并评价多重PCR联合毛细管电泳技术(mPCR?CE)同时检测碳青霉烯酶基因blaKPC、blaNDM、blaOXA?48和blaVIM的方法.方法 设计特异性引物,建立多重PCR扩增体系,利用毛细管电泳检测扩增产物.以携带blaKPC、blaNDM、blaOXA?48和blaVIM的细菌作为阳性对照菌株,以携带其他β?内酰胺酶基因细菌作为阴性对照,用于mPCR?CE的灵敏度、特异性评价.收集68株碳青霉烯耐药菌株,利用mPCR?CE方法进行检测,并与PCR扩增后测序结果比较.结果 mPCR?CE检测携带blaKPC、blaNDM和blaVIM细菌最低检测限均为1.5×102 CFU/mL,检测携带blaOXA?48细菌为1.5×103 CFU/mL,并且与携带其他β-内酰胺酶基因的细菌无交叉反应.经mPCR?CE检测,68株临床分离菌株中37株携带blaKPC,8株携带blaNDM,未检测到携带blaOXA?48和blaVIM的菌株,结果与PCR扩增后测序结果完全一致.结论 mPCR?CE可用于临床分离菌株的主要碳青霉烯酶基因检测.