大熊猫轮状病毒PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 苏小艳 李林 燕霞 张东升 侯蓉 刘颂蕊
• 来源期刊: 兽类学报
• 关键词: 大熊猫轮状病毒 PCR检测 Vp7基因 质粒构建
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 动物疫病专题|SPECIAL SUBJECT OF ZOONOTIC DISEASES
• 页码范围: 254-260
• 页数: 7页
• 分类号: S858.92
• 语种: 中文
• DOI: 10.16829/j.slxb.150454

摘要

轮状病毒是威胁大熊猫健康的主要病原微生物之一.为了对大熊猫轮状病毒进行快速、方便且准确地检测,研发适合于基层饲养单位和保护区的检测方法是非常有必要的.本研究通过合成大熊猫轮状病毒Vp7基因序列,构建了 PUC-VP7的重组质粒,并将其作为阳性对照对大熊猫轮状病毒样本进行PCR检测和分析.结果表明,在进行PCR扩增分析时,该质粒和病毒cDNA二者均在340 bp处出现了特异性条带.此外,对收集到的45份大熊猫粪便样本进行轮状病毒抗原检测时,其中2份样品在340 bp处出现条带,该基因片段与大熊猫轮状病毒CH-1株的相似性为99.89％.本研究构建的PUC-VP7质粒不但可以作为大熊猫轮状病毒PCR检测中的阳性质控品,而且还能有效地促进该PCR病毒检测技术在基层饲养单位和保护区的推广和应用.