siRNA沉默环指蛋白8基因对裸鼠人鼻咽癌移植瘤放疗增敏作用的实验研究

• 作者: 王茂鑫 陈贤明 龚宏勋 陈十燕 杨帆 陈函
• 来源期刊: 东南国防医药
• 关键词: 鼻咽癌 环指蛋白8 放射治疗 小干扰RNA 动物试验
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic Research
• 页码范围: 244-248
• 页数: 5页
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672⁃271X.2021.03.005

摘要

目的 探讨环指蛋白8(RNF8)的放疗抵抗作用及沉默RNF8后对鼻咽癌的放疗增敏作用及其机制.方法 分别将鼻咽癌CNE?1细胞株及稳定转染的RNF8沉默的CNE?1细胞株注射入裸鼠背部皮下,建立裸鼠鼻咽癌移植瘤模型.将肿瘤长至直径8～10 mm的裸鼠30只按随机数字法分为RNF8未沉默组(RNF8+组)和RNF8沉默组(RNF8-组),每组按放疗照射剂量的不同又分5个亚组,每个亚组3只,分别给予0、4、8、12、16Gy照射,其中0 Gy为对照亚组.采用局部分割照射,每次2 Gy.照射完成10 d后杀鼠取瘤,称重观察抑瘤情况,计算抑瘤率;取2组8Gy剂量亚组肿瘤制成细胞悬液,应用流式细胞仪检测凋亡率,应用流式细胞仪检测2组8 Gy剂量亚组中RNF8和DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA?PKcs)、共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)的表达. 结果 RNF8在RNF8-组中只有微量表达(0.11±0.03),而在RNF8+组中表达明显升高(1.18±0.23),差异有统计学意义(P<0.01).RNF8+组和RNF8-组分别在16 Gy时抑瘤率最大.RNF8+组抑瘤率在各个剂量点均低于RNF8-组,其中8 Gy时差异最大(P<0.01).因此选择RNF8+组8 Gy剂量亚组和RNF8-组8 Gy剂量亚组进行比较.RNF8+组8 Gy剂量亚组凋亡率明显低于RNF8-组8 Gy剂量亚组(P<0.05).RNF8+组8 Gy剂量亚组中ATM表达(49.3±5.3)较RNF8-组8 Gy剂量亚组(23.4±2.6)明显升高(P<0.01),而DNA?PKcs在组间表达差异无统计学意义(P>0.05). 结论 RNF8可以导致鼻咽癌细胞的放疗抵抗,其机制是通过激活以ATM为主的同源重组(HR)途径来修复损伤的肿瘤细胞DNA,沉默RNF8可以增加鼻咽癌的放疗敏感性.