下调miR-616-3p对补体攻击骨髓间充质干细胞的影响

• 作者: 周建国 刘如月 韩枫 刘一亮
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠骨髓间充质干细胞 补体系统 miR-616-3p 膜补体调节蛋白 靶向结合
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 69-74
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 语种: 中文
• DOI: 10.3977/j.issn.1005-8478.2021.01.15

摘要

[目的]探讨miR-616-3p对补体系统攻击骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响及其机制.[方法]从SD大鼠骨髓腔中分离提取并获得原代BMSCs,将miR-616-3p抑制剂转染到rBMSCs中,再采用大鼠颈静脉血分离的异体血清(ARS)进行干预.采用qRT-PCR法检测各组rBMSCs细胞中miR-616-3p的表达水平,Western Blot法检测膜补体调节蛋白CD46和凋亡蛋白cleaved Caspase-3的表达水平,MTT法检测各组rBMSCs细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率以及补体攻击复合物(MAC)沉积情况,采用双荧光素酶报告系统验证miR-616-3p与CD46的靶向作用关系.[结果]ARS干预能促进rBMSCs中miR-616-3p表达,抑制CD46蛋白表达,并降低rBMSCs增殖活性,促进rBMSCs凋亡以及增加rBMSCs表面MAC沉积.抑制miR-616-3p能促进ARS干预条件下rBMSCs的存活及CD46蛋白表达,抑制rBMSCs凋亡,减少rBMSCs表面MAC沉积.双荧光素酶报告系统实验证实CD46是miR-616-3p靶基因.[结论]下调miR-616-3p通过靶向结合膜补体调节蛋白CD46可以促进BMSCs细胞增殖,抑制细胞凋亡,进而抑制补体系统对rBMSCs的攻击作用.