miR-218通过靶向TNFR1抑制破骨细胞分化并预防骨质疏松症

• 作者: 张建业 张卫华 韩俊 陈东
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: miR-218 TNFR1 破骨细胞 骨质疏松症
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 198-204
• 页数: 7页
• 分类号: R681
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2021.02.008

摘要

目的 探讨miR-218通过靶向TNFR1在破骨细胞分化中的影响及作用机制.方法 采用双侧卵巢切除法制备骨质疏松症模型并进行验证,qRT-PCR检测骨质疏松症小鼠的骨髄单核细胞(BMMs)中miR-218的表达水平;qRT-PCR检测正常小鼠的BMMs在破骨细胞分化过程中NFATc1、TRAF6、miR-218的表达变化,并用TRAP染色观察破骨细胞的生成情况;miR-218模拟物(miR-218 mimics)和miR-218抑制剂(miR-218 inhibitor)转染入BMMs中,qRT-PCR检测NFATc1、TRAF6、miR-218的表达水平,并用TRAP染色观察破骨细胞的生成情况;生物信息学分析和荧光素酶报告基因分析,预测和鉴定miR-218靶标;Western blot检测TNFR1蛋白的表达.结果 骨质疏松症小鼠的BMMs中miR-218的表达水平较低(P＜0.01);当正常小鼠的BMMs分化为破骨细胞时,NFATc1、TRAF6的表达水平上调(P＜0.01),miR-218的表达水平下调(P＜0.01),TRAP染色阳性的多核巨细胞形成增加;上调miR-218抑制BMMs在体外分化为破骨细胞,且NFATc1、TRAF6的表达减弱(P＜0.01,P＜0.05),TRAP染色阳性的多核巨细胞形成减少;通过生物信息学和荧光素酶报告基因检测分析,TNFR1被证实是miR-218的直接靶标,上调miR-218时,TNFR1蛋白表达减少.结论 miR-218通过靶向TNFR1在破骨细胞形成中具有重要作用.因此,miR-218在骨质疏松症的治疗中具有治疗潜力.