乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌icaA/D基因缺失株的构建及其生物被膜形成能力与耐药性分析

• 作者: 韩雨希 张婷婷 吕丽丽 李槿年
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 icaA/D基因缺失株 生物被膜形成能力 最小抑菌浓度
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 兽医微生物学
• 页码范围: 93-103
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.200231

摘要

[背景]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是一种具有多重耐药性的人畜共患病原菌,常引起奶牛乳房炎等疾病.形成生物被膜是MRSA重要的耐药机制之一.研究发现ica操纵子调控的胞间多糖黏附素(Polysaccharide Intercellular Adhesin,PIA)通过促进MRSA的黏附与聚集介导生物被膜形成,icaA和icaD基因共表达可显著提高MRSA的N-乙酰葡聚糖转移酶活性,但icaA/D蛋白对MRSA生物被膜形成和耐药性的影响仍不清楚.[目的]探讨icaA/D基因、MRSA生物被膜形成及耐药性三者之间的相关性,为寻找药物作用新靶点提供科学依据.[方法]以具有多重耐药性且生物被膜形成能力强的乳源MRSAM5分离株为研究对象,利用同源重组技术构建其icaA/D基因缺失株;利用FITC-ConA染色结合激光共聚焦显微镜观察野生株与icaA/D基因缺失株的生物被膜形成过程与能力;采用微量肉汤稀释法测定14种抗菌药物对野生株与icaA/D基因缺失株的最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC).[结果]构建了MRSAM5的icaA/D基因缺失株.激光共聚焦显微镜下观察到野生株在培养16 h后形成了一层厚的成熟生物被膜,随后开始解离,直至120h完全解离;而icaA/D基因缺失株在培养后16h仅形成一薄层生物被膜,48 h完全解离.10种受试抗菌药物对缺失株的MIC较野生株减小,而且缺失株对8种药物的敏感性由原来的耐药或中介转变为中介或敏感.[结论]icaA/D基因缺失可明显降低MRSA的生物被膜形成能力与耐药性.