鸭肠炎病毒gD蛋白亚细胞定位及其对病毒感染相关作用分析

• 作者: 张杨子 王璇 吴玙彤 潘淑惠 文正常 文明
• 来源期刊: 中国动物保健
• 关键词: 鸭肠炎 病毒gD蛋白 亚细胞定位 病毒感染作用
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 科研动态
• 页码范围: 101-102
• 页数: 2页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-4754.2021.01.074

摘要

本试验旨在研究鸭肠炎病毒(DEV)gD蛋白亚细胞定位及其对病毒感染的相关作用.本研究经过对DEV病毒扩增处理,利用原核表达系统获得重组gD基因胞外区蛋白(gDw),以兔抗gDw IgG为抗体,进行免疫荧光反应,对比病毒对照组,检查gD蛋白在吸附、侵入以及传播之间起到的作用.结果表明,经过荧光显微镜观察,接种DEV后4h可见绿色荧光,主要在细胞核附近.持续观察6～24h发现荧光随着时间增加明显加强,细胞轮廓清晰,主要存在于胞浆中.激光显微镜下观察接种DEV后4h可观察到绿色荧光,经过PI染色12h后可见绿色荧光更加明显,主要在胞浆中呈现,在胞核内没有出现特异性荧光.染色后72h可在细胞膜上观察到绿色荧光,且轮廓清晰.添加兔抗gDw IgG不会影响病毒粒子吸附率,在病毒粒子吸附中糖蛋白D并未产生明显作用.观察组吸附率和噬斑数与对照组有显著差异(P<0.05),添加兔抗gDw IgG后可有效降低病毒粒子侵入DEF,糖蛋白D具有阻止病毒侵入DEF的作用.添加兔抗gDw IgG后病毒噬斑直径明显减小,证实了在DEV细胞之间传播过程中糖蛋白D起到抵抗作用.DEF感染DEV后2h可检查到gD基因转录,经过免疫荧光实验,4h后可合成gD蛋白,出现在核膜和核周,12h出现在胞浆上,72h出现在细胞膜上.DEVgD参与病毒侵入以及细胞之间传播的作用,对于病毒吸附不明显,添加gDw Igw抗体后,细胞病变具有延迟反应.