嵌入式染料的荧光各向异性在核酸分析、荧光探针构建和生物传感等领域具有重要的应用意义,而目前基于框架核酸的嵌入式染料的荧光各向异性的研究很少.本工作通过DNA序列设计精确调控DNA四面体(DNA Tetrahedrons,TDN)框架核酸的尺寸,利用同步辐射X射线小角散射表征DNA纳米结构,结合嵌入式染料SYBR Green I、DAPI和DiYO-1,构建了一系列TDN荧光各向异性探针,研究了TDN尺寸对探针荧光各向异性的影响.实验结果表明:对于单嵌入式SYBR Green I和DAPI,随着TDN尺寸增加,探针的荧光各向异性增加.对于双嵌入式DiYO-1,探针的荧光各向异性随着四面体棱长的增加先降低后增加.该研究表明通过精确调控TDN尺寸可以实现对荧光染料各向异性的调控,以框架核酸为载体的荧光各向异性探针有望成为一种新型的优异探针.