李矮缩病毒重组酶聚合酶扩增一侧流层析试纸条检测方法的建立

• 作者: 陈玲 闫国华 张晓明 周宇 王晶 段续伟 李彦林 张开春
• 来源期刊: 园艺学报
• 关键词: 李矮缩病毒 樱桃 重组酶聚合酶扩增一侧流层析试纸条 检测
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 新技术新方法|New Technology and New Mathod
• 页码范围: 183-192
• 页数: 10页
• 分类号: S662.5|S432.4+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2020-0174

摘要

根据李矮缩病毒(prune dwarf virus,PDV)外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物和探针,建立了PDV的重组酶聚合酶扩增一侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification combined with lateral flow dipstick,RPA-LFD)检测方法.该方法在恒温39 ℃下反应20min,具有标记的扩增子可达到检测水平.扩增子检测室(amplicon detection champer)中的侧流层析试纸条在20 min内呈现可视化检测结果.该方法与侵染樱桃的另外6种病毒(CGRMV、PNRSV、LchV-1、PBNSPaV、CVA和CNRMV)无交叉反应.灵敏度试验表明,用RPA-LFD方法检测PDV的灵敏性是PCR方法的10倍.用该方法检测13个田间样品,其检测结果与PCR检测结果一致.RPA-LFD法具有操作简单、快速、灵敏度高、特异性强等特点,适合对PDV样品的快速检测与鉴定.