亨廷顿相关蛋白1在丙戊酸钠诱导神经干细胞分化过程中的表达和作用

• 作者: 王珊珊 李雯 何辉 秦建兵 田美玲 赵荷艳 成翔 金国华
• 来源期刊: 解剖学报
• 关键词: 亨廷顿相关蛋白1 丙戊酸钠 神经干细胞 神经元 分化 实时定量聚合酶链反应 大鼠
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 神经生物学|Neurobiology
• 页码范围: 182-188
• 页数: 7页
• 分类号: R332.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.02.004

摘要

目的 探讨丙戊酸钠(VPA)诱导神经干细胞(NSCs)向神经元分化过程中亨廷顿相关蛋白1(HAP-1)的表达及其作用.方法 分离培养SD大鼠海马NSCs,应用Real-time PCR和Western blotting检测VPA诱导NSCs向神经元分化过程中0、1、3和5d时HAP-lmRNA和蛋白的表达变化;Real-time PCR检测成年SD大鼠多组织及NSCs、神经元和星形胶质细胞中HAP-1 mRNA的表达;应用小干扰RNA技术下调NSCs中HAP-1的表达后,Real-time PCR和Western blotting分别检测神经元特异分子微管解聚蛋白2(Stmn-2)、神经元分化因子l(Neurod-1)、微管相关蛋白2(Map-2)和突触蛋白1(Syn-1)基因和神经元特异性标志物β-微管蛋白Ⅲ(Tuj-1)的表达水平,应用免疫荧光检测NSCs向Tuj-1阳性神经元分化的比例,并观察神经元发育情况.结果 与对照组相比,VPA组NSCs向神经元分化过程中HAP-1 mRNA和蛋白在VPA处理后1d和3d表达明显上调;HAP-1mRNA在中枢神经系统的海马中呈优势表达,在神经元中表达较高,NSCs中表达较低,星形胶质细胞中表达最低;干扰HAP-1表达后,VPA诱导NSCs向神经元分化的比例减少,神经元发育变差.结论 VPA可能通过上调HAP-1的表达促进NSCs向神经元分化.