鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 吕炫 张淼 胡增金 李佳明 张冲 朱英奇 魏娟文 吴琼 张瑞辰 夏伦志 王桂军
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 关键词: 鹅星状病毒 衣壳纤突蛋白VP27 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖|ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY SCIENCES·AQUICULTURE
• 页码范围: 412-417
• 页数: 6页
• 分类号: S858.332.65+9.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2021.02.018

摘要

采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体.重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta.挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠.利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体.结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1:64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27.