真核表达产物Y3诱导烟草对烟草花叶病毒的抗性研究

• 作者: 张志云 边叶雨 黄航 韩潇潇 吴兰 吴丽萍
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 关键词: Y3蛋白 真核表达 烟草花叶病毒 诱导抗性
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文|RESEARCH REPORTS
• 页码范围: 323-330
• 页数: 8页
• 分类号: Q945.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2021.02.006

摘要

从毛头鬼伞Coprinus comatus中提取的碱性糖蛋白Y3可以降低烟草花叶病毒(TMV)的侵染.克隆获得Y3蛋白cDNA后与真核表达载体pPIC-9k连接,重组载体pPIC-9k-Y3成功电转化入毕赤酵母Pichia pastoris后,转化子在28℃、250 r/min培养条件下,使用1.0％甲醇诱导表达6d,成功实现了Y3蛋白的真核表达.300μg/mL浓度的Y3蛋白对普通烟进行诱导处理后摩擦接种TMV结果表明,诱导处理后烟草体内除过氧化物酶POD外,多酚氧化酶PPO、苯丙氨酸解氨酶PAL和β-1,3葡聚糖酶活性都有不同程度提高.蛋白处理24 h后植株中PPO活性达到最大,为对照组的2倍.利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究抗性相关基因表达情况,Y3诱导后烟草植株碱性病程相关基因1(PR1-b)、病程相关基因非表达子1(NPR1)、PAL在转录水平上均显著上调(P＜0.05).推测真核表达产物Y3蛋白可通过提高水杨酸信号途径相关防御酶活性以及抗病基因转录来诱导烟草对TMV产生系统抗性,为Y3蛋白作为生物农药开发提供理论基础.