中药材鹿心分子鉴定方法及检测试剂的研究

• 作者: 王艳双 姜海瀛 刘美琳 高丽君 李明成 孙丽媛 张丽华 艾金霞
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 鹿心 DNA指纹鉴定 DNA检测试剂盒 分子克隆 测序技术
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 544-551
• 页数: 8页
• 分类号: R282.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2021.02.028

摘要

目的 建立中药材鹿心DNA指纹鉴定方法,研发鹿心DNA检测试剂盒.方法 以梅花鹿和马鹿mtDNACytb基因作为靶基因,设计小片段特异性引物,研制鹿心DNA提取及PCR检测试剂;应用分子克隆及测序技术,克隆鹿心对照药材;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察;对市售鹿心样品进行真伪鉴定.结果 自主研发的试剂提取鹿心的DNA浓度纯度均达到PCR的要求;在退火温度为63℃时引物的特异性最强;克隆测序后的鹿心DNA序列与鹿心mtDNA Cytb,特异指纹区段序列一致;自主研发的试剂重现性、稳定性良好,灵敏度达到0.5％;对市售30个鹿心样品进行检测,伪品率为40％.结论 建立的鹿心DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠,研制的鹿心DNA检测试剂盒操作简便、结果稳定.