PTEN在石英诱导的HELF细胞FAK和α-SMA改变中的作用

• 作者: 刘凯 钱源源 张璘 王鑫 董一文 康宁 叶萌
• 来源期刊: 卫生研究
• 关键词: 石英 人胚肺成纤维细胞 第10号染色体丢失性磷酸酶-张力蛋白 黏附斑激酶 平滑肌肌动蛋白 矽肺
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 223-229
• 页数: 7页
• 分类号: R135.2|Q55
• 语种: 中文
• DOI: 10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2021.02.010

摘要

目的 探讨第10号染色体丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)在石英诱导人胚肺成纤维细胞(human embryo lung fibroblasts,HELF)黏附斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)改变中的作用.方法 分别在含0、25、50、100和200 μg/cm2石英的低血清培养基中培养HELF细胞24 h,用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)法确定石英染毒HELF细胞的剂量,同时在倒置显微镜下观察不同剂量石英对HELF细胞形态的影响.50 μg/cm2石英溶液分别染毒HELF细胞0、1、2、4、8、12和24h,0h组HELF细胞作为对照组,并用Western blot实验检测HELF在不同染毒时间点的PTEN、p-PTEN、FAK、p-FAK和α-SMA蛋白水平.2×10-3 mol/L PTEN抑制剂VO-Ohpic与石英共同处理HELF细胞24 h,同时设空白HELF细胞组和HELF石英染毒组,用Western blot实验检测各组HELF细胞FAK、p-FAK和α-SMA蛋白表达情况.结果 随着石英浓度增加,HELF细胞活力呈先增加后下降的变化,其中50 μg/cm2石英染毒组细胞活力(144.91±5.10)显著高于0 μg/cm2组(101.23±6.57)(P＜0.05).与对照组相比,12 h 和24 h 的 PTEN 和 p-PTEN 表达水平均显著降低[PTEN:12 h 为(0.44±0.08),24 h 为(0.25±0.02);p-PTEN:12 h 为(0.09±0.01),24 h 为(0.01±0.00)];而 12 h(0.92±0.05)和24 h(0.89±0.01)的 FAK,以及24h 时的 p-FAK(0.77±0.02)和α-SMA(1.32±0.01)表达水平则显著升高(P＜0.05).石英和PTEN抑制剂共同处理组HELF细胞FAK(0.25±0.03)、p-FAK(0.40±0.02)和 α-SMA(0.36±0.01)表达水平均显著高于石英染毒组(P＜0.05).结论 在石英诱导HELF细胞FAK、p-FAK和α-SMA表达水平增高的过程中,PTEN负调控FAK、p-FAK和α-SMA表达水平.