诱变酒酒球菌中抗酸候选基因ATPase和FtsH的表达差异分析及功能验证

• 作者: 文向圆 原雨欣 余东亮 刘树文
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 抗酸 生物信息学分析 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 215-224
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2021.01.027

摘要

为研究胁迫条件下具有不同表达趋势的抗酸候选基因ATPase和FtsH是否可以提高菌株的抗酸性,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定诱变酒酒球菌抗酸菌株b1和酸敏菌株b2中ATPase和FtsH在pH 4.8(最适条件)和pH 3.0(胁迫条件)ATB培养基中的相对表达量,分析其表达趋势;从b1中克隆ATPase和FtsH,分别命名为ATPase1和FtsH1,从b2中克隆ATPase和FtsH,分别命名为ATPase2和FtsH2,分析序列差异;将ATPase1,ATPase2,FtsH1和FtsH2分别在植物乳杆菌XJ25中做功能验证,构成重组植物乳杆菌a1,a2,f1和f2.以含空载体的植物乳杆菌con为对照,于pH 3.2的MRS培养基中测定重组植物乳杆菌的生长能力.定量结果表明ATPase在菌株b1和b2中表达量均显著上调;FtsH在b1中不变,在b2中显著上调.ATPase1和ATPase2在功能结构域内有3处非同义突变,FtsH1和FtsH2在跨膜结构域内有1处非同义突变.功能验证结果表明:a1和a2的生长能力均强于con,且a1和a2生长能力无差异;f1生长能力强于con,f2生长能力与con无差异.由此可知ATPase1,ATPase2和FtsH1均可以提高菌株抗酸性.