基于CaSR表达及AKT磷酸化水平的花旗泽仁改善胰岛素抵抗作用机制

• 作者: 张义 于鹏洋 郑思琦 孙丽英 葛鹏玲
• 来源期刊: 中成药
• 学科: 医学
• 关键词: 花旗泽仁 胰岛素抵抗 CaSR AKT L02肝细胞
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1528.2021.01.009

摘要

目的 基于CaSR表达及AKT磷酸化水平考察花旗泽仁改善胰岛素抵抗的作用机制.方法 采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立IRL02肝细胞模型,并通过葡萄糖消耗实验对细胞模型进行鉴定.采用免疫荧光法和qRT-PCR技术检测CaSR表达的细胞定位以及CaSR mRNA表达,同时采用Western blot技术检测CaSR蛋白、磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白表达.结果 高浓度胰岛素诱导后的L02肝细胞模型葡萄糖消耗量和摄取率明显下降(P＜0.01).免疫荧光实验结果表明,模型对照组的CaSR分布较稀疏,相对应的,给予花旗泽仁后的CaSR分布较密集.通过qRT-PCR实验发现,模型对照组的CaSR mRNA表达显著下调(P＜0.01);与模型对照组比较,花旗泽仁组、阳性对照组中CaSR mRNA表达明显上调(P＜0.01).同时Western blot检测结果表明,模型对照组的CaSR和磷酸化AKT(Thr308和Ser473)蛋白表达显著下降(P＜0.01),与模型对照组比较,花旗泽仁组、阳性对照组中CaSR和磷酸化AKT(Thr308和Ser473)蛋白表达明显升高(P＜0.01,P＜0.05).结论 该实验证明了花旗泽仁通过影响PI3K通路改善胰岛素抵抗,可能与通过调节CaSR,激活PI3K/AKT信号通路AKT上的2个(Thr308,Ser473)磷酸化位点的蛋白表达有关.