基于热对流PCR技术对乳品中布鲁杆菌的检测技术研究

• 作者: 杨洪彩 赵国玉 陈欣乐 艾依热提·买买提 木合塔尔·艾山 马玉文豪 张杰
• 来源期刊: 疾病预防控制通报
• 关键词: 布鲁杆菌 乳品 热对流PCR 现场检测
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究|EXPERIMENTAL STUDY
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: R378.5|R446.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13215/j.cnki.jbyfkztb.2102013

摘要

目的 运用热对流PCR技术检测乳品中布鲁杆菌.方法 根据布鲁杆菌保守基因序列,设计合成引物和探针,通过优化反应体系,配合商品化核酸提取试剂盒,建立检测乳品中布鲁杆菌的热对流PCR方法,并与常规荧光定量PCR方法的敏感性与特异性比较,以验证该检测方法的可靠性.结果 热对流PCR检测敏感性与常规荧光定量PCR检测敏感性基本一致,差异无统计学意义(t=85.500,P＞0.05),且该布鲁杆菌热对流PCR方法能检测出的乳品样本中布鲁杆菌含量最低浓度为10 cfu/ml;含有大肠杆菌、溶血性链球菌、克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的乳液经扩增,均为阴性结果;只有含布鲁杆菌乳液的阳性对照,经热对流PCR仪扩增后结果显示为阳性;热对流PCR方法(22.3％)与常规荧光定量PCR方法(24.1％)阳性检出率差异无统计学意义(x2=0.250,P＞0.05).结论 热对流PCR方法检测乳品中布鲁杆菌可靠性高、扩增反应时间短、方便快捷、仪器成本低廉,适用于基层现场检测病原.