新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)最低检测限的确定

• 作者: 董江锴 黄青红 范娟 黄迎燕 张云涛 杨晓明
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 关键词: 新型冠状病毒 核酸检测试剂盒 荧光PCR法 最低检测限
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 诊断制剂
• 页码范围: 410-414
• 页数: 5页
• 分类号: R373.1
• 语种: 中文

摘要

目的 确定上海捷诺生物科技有限公司研制生产的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)最低检测限,并验证其在最低检测限水平是否可有效检出新型冠状病毒.方法 将20份不同临床阳性样本稀释至62 500、12 500、2 500、500、100 copies/mL 5个浓度梯度,利用新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)进行3次重复检测,初步确定最低检测限范围;用3批生产的试剂盒对稀释至1 500、700、500、300、150 copies/mL 5个浓度梯度的20份不同临床阳性样本进行20次重复检测,进一步确定最低检测限;另取25份不同临床阳性样本稀释至最低检测限水平,用连续3批生产的试剂盒进行20次重复检测,以验证其最低检测限.结果 在62 500、12 500、2 500、500 copies/mL 4个浓度水平上,样本阳性检出率均为100％,在100 copies/mL浓度水平上,样本阳性检出率≤55％,初步最低检测限在500—100 copies/mL之间;经20次重复测定,1 500、700、500 copies/mL 3个浓度水平对样品的阳性检出率≥95％,300、150 copies/mL 2个浓度水平对样品的阳性检出率均＜95％,确定最低检测限为500 copies/mL;25份稀释至最低检测限浓度水平的阳性样品,阳性检出率均达95％以上.结论 上海捷诺生物科技有限公司研制生产的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)的最低检测限确定为500 copies/mL,经验证,该试剂盒对最低检测限水平的病毒样本可有效检出病毒核酸,符合我国对检测试剂最低检测限的相关要求.