miRNA-618对急性单核细胞白血病THP-1细胞增殖和凋亡调控的研究

• 作者: 李峰 王刚 步鹏 杨林花
• 来源期刊: 白血病·淋巴瘤
• 关键词: 白血病，单核细胞，急性 微RNAs 细胞增殖 细胞凋亡 miRNA-618
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 156-160
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115356-20200924-00235

摘要

目的:探讨miRNA-618（miR-618）对急性单核细胞白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测miR-618在THP-1细胞和健康人外周血分离的单核细胞中的相对表达量。构建过表达miR-618质粒载体，以空载体作为阴性对照，将二者分别转染THP-1细胞，设定为miR-618过表达组和阴性对照组。采用CCK-8法和流式细胞术分别检测各组THP-1细胞增殖和凋亡情况。采用TargetScan软件预测miR-618靶基因，通过荧光素酶报告基因实验对其进行验证。采用蛋白质印迹法检测miR-618过表达组或阴性对照组的THP-1细胞和健康人外周血单核细胞中预测的miR-618靶基因蛋白表达的水平。结果:PCR结果显示，与健康人外周血分离的单核细胞相比，THP-1细胞中miR-618表达量低（ P<0.05）。CCK-8法检测结果显示，与阴性对照组比较，miR-618过表达组THP-1细胞增殖能力降低（转染0、24、48、72 h细胞吸光度值：0.20±0.03比0.20±0.03、0.28±0.02比0.35±0.03、0.34±0.03比0.43±0.04、0.39±0.02比0.53±0.05，均 P<0.05），细胞晚期凋亡率升高[（27.1±0.1）%比（14.9±0.1）%， t=2.13， P=0.03]。TargetScan软件预测miR-618靶基因为ARPP19。荧光素酶报告基因实验结果显示，转染野生型ARPP19基因质粒+ miR-618基因质粒组的THP-1细胞相对荧光素酶活性均高于空白对照组和转染野生型ARPP19基因质粒+ miR-618空载质粒组（0.170±0.003比0.100±0.004、0.100±0.001，均 P<0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，miR-618过表达组THP-1细胞ARPP19蛋白表达水平低于阴性对照组，而两组健康人外周血单核细胞中ARPP19蛋白表达水平相近。 结论:miR-618可能通过抑制急性单核细胞白血病THP-1细胞ARPP19的表达而抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。