微小RNA-21-5p调控Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的研究

• 作者: 何英 程云 石磊 邢周雄 陈淼
• 来源期刊: 中华危重病急救医学
• 关键词: 肺泡上皮细胞，Ⅱ型 抗凋亡 微小RNA-21-5p
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 344-348
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121430-20200429-00349

摘要

目的:探讨微小RNA-21-5p（miR-21-5p）是否具有抗人Ⅱ型肺泡上皮细胞（ATⅡ）凋亡的作用。方法:体外培养人ATⅡ细胞，待细胞生长至光镜下可见层状体和微绒毛时用于实验。将细胞分为空白对照组（直接培养，不予任何处理）、过氧化氢（H 2O 2）损伤组（加入0.5 mmol/L H 2O 2）、miR-21-5p过表达组〔加入感染复数（MOI）为100的miR-21-5p慢病毒过表达载体与0.5 mmol/L H 2O 2共培养〕和空病毒对照组（加入miR-21-5p慢病毒空白载体与0.5 mmol/L H 2O 2共培养）。各组分别于细胞培养0、12、24、36、48 h采用细胞增殖及毒性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖情况；于培养24 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。 结果:①细胞增殖活性检测结果：随着细胞培养时间的延长，空白对照组细胞增殖活性逐渐增强，而加入0.5 mmol/L H 2O 2处理后细胞增殖活性则逐渐下降；但miR-21-5p过表达组细胞增殖活性较H 2O 2损伤组和空病毒对照组下降缓慢，48 h时细胞增殖活性明显高于H 2O 2损伤组和miR-21-5p空病毒对照组〔吸光度（ A）值：0.295±0.005比0.184±0.005、0.169±0.002，均 P<0.05〕。说明H 2O 2及慢病毒均加快了细胞损伤，而miR-21-5p可抑制细胞凋亡。②细胞凋亡检测结果：与空白对照组比较，加入0.5 mmol/L H 2O 2处理后细胞凋亡率明显升高；而miR-21-5p过表达组细胞凋亡率较H 2O 2损伤组和空病毒对照组均明显降低〔早期细胞凋亡率：（14.31±0.12）%比（24.50±0.12）%、（23.41±0.13）%，晚期细胞凋亡率：（8.12±0.13）%比（9.71±0.11）%、（10.41±0.15）%，总体细胞凋亡率：（22.33±0.12）%比（34.21±0.10）%、（33.82±0.14）%，均 P<0.05〕，进一步证明miR-21-5p具有抗细胞凋亡作用。 结论:miR-21-5p具有抗人ATⅡ凋亡的作用。