超高效液相色谱-串联质谱法定量分析尿液中色氨酸及其代谢产物

• 作者: 李慧 崔兰冲 章国磊 张萌萌 焦丽丽 吴巍
• 来源期刊: 色谱
• 关键词: 超高效液相色谱-串联质谱 柱前衍生 色氨酸-犬尿氨酸代谢途径 尿液
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与应用|Technical Notes
• 页码范围: 518-525
• 页数: 8页
• 分类号: O658
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.06022

摘要

基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)建立定量分析色氨酸(Trp)及代谢产物3-OH-犬尿氨酸(3-OH-Kyn)、3-OH-邻氨基苯甲酸(3-OH-AA)、黄尿酸(XA)、犬尿氨酸(Kyn)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿喹啉酸(KA)和5-羟色胺(5-HT)的方法,应用该方法分析其在尿样中的含量,探讨排泄规律.将尿样稀释、离心后,加入丹磺酰氯(DNS-Cl)衍生,经Thermo C18色谱柱(50 mm×3 mm,2.7μm)分离和0.1％甲酸和甲醇梯度洗脱后,采用电喷雾电离(ESI)源,在正离子扫描和多反应监测(MRM)模式下检测.以咖啡酸(CA)为内标,定量分析.结果显示,8种目标化合物的线性关系良好,相关系数(R2)≥0.9740,检测灵敏(LOD为0.005～0.5 ng/mL),回收率高(93.24％～107.65％).采用本方法检测分析了健康志愿者70个尿液样本,在尿样中检测到Trp原型及其7种代谢产物.结果表明,体内的Trp是通过原型和代谢两种方式排泄:Trp原型的含量为5.22～20.88μg/mL;尿液中经代谢后排泄的Trp量是原型的124％～268％,即体内的Trp主要经代谢后排出体外.方法主要研究了Trp-5-HT和Trp-Kyn两条途径的代谢产物含量,Trp经Kyn降解生成的3-OH-AA和3-OH-Kyn含量较多,即Trp-Kyn是体内Trp的主要代谢途径.方法通过UPLC-MS/MS实现了尿液中Trp及其代谢产物含量的检测,能为临床检查提供技术和理论支持.