鸟分枝杆菌PPE25蛋白对THP-1巨噬细胞免疫效应的影响

• 作者: 宁雪萍 田爽 龙倩 何会姣 陈蕴玟 凌敏
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 鸟分枝杆菌 重组PPE25蛋白 THP-1巨噬细胞 细胞凋亡 免疫应答
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 论著|Research Paper
• 页码范围: 425-430,477
• 页数: 7页
• 分类号: R378
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2021.05.0064

摘要

[目的]探讨鸟分枝杆菌PPE25在调控人源THP-1巨噬细胞免疫应答反应中的作用及机制.[方法]通过基因扩增、载体构建、诱导表达、分离纯化等过程制备鸟分枝杆菌重组PPE25蛋白;将重组PPE25蛋白作用于THP-1巨噬细胞后,利用流式细胞术检测巨噬细胞凋亡率;运用ELISA方法检测细胞上清中TNF-α的浓度;采取Western Blot-ting方法检测Bax、Bcl-2、TLR2、TLR4的蛋白表达水平;采用qPCR法检测IL-6、IL-12的mRNA表达水平.[结果]利用大肠杆菌表达系统成功制备重组PPE25蛋白;重组PPE25蛋白作用巨噬细胞后,细胞凋亡率升高(P＜0.05),细胞中Bax蛋白表达水平升高(P＜0.05),而Bcl-2蛋白表达水平降低(P＜0.05);另外,细胞中TLR2、TLR4蛋白表达水平上升(P＜0.05),TNF-α含量升高(P＜0.05),IL-6及IL-12表达水平升高(P＜0.05).[结论]鸟分枝杆菌PPE25蛋白可以促进人源THP-1巨噬细胞凋亡,并可以通过激活巨噬细胞TLR2或TLR4信号途径促进细胞炎症因子IL-6及IL-12的分泌,从而诱导机体产生免疫应答,抵御鸟分枝杆菌感染.