高分辨率熔解曲线法检测饮用水中两种假单胞菌

• 作者: 岳苑 周梦诗 徐娟 李睿 何利华 赵飞 张建中 龚杰
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 关键词: 高分辨率熔解曲线 铜绿假单胞菌 恶臭假单胞菌 包装饮用水 天然矿泉水
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究|Experimental Studies
• 页码范围: 484-488
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2021.00.069

摘要

目的 用高分辨率溶解曲线法分离鉴定包装饮用水和天然矿泉水中的铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌.方法 本研究以假单胞菌16S rDNA为靶基因,采用高分辨率熔解曲线的方法,利用一对引物同时鉴别铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌.结果 Tm值在83℃～84℃出现熔解峰为恶臭假单胞菌,Tm值在84℃～85℃出现熔解峰为铜绿假单胞菌.通过对梯度含量的假单胞菌标准菌株DNA和多种真菌细菌的DNA进行高分辨率熔解曲线检测,显示该方法对其他12种非目标菌无交叉反应,检测限分别为41个拷贝数和48个拷贝数.结论 HRM-Real time PCR检测体系可通过一对引物对上述2种假单胞菌进行有效的鉴别与区分,且具有良好的特异性和灵敏度.该方法可用于包装饮用水和天然矿泉水的日常检测中,为假单胞菌的快速检测提供了新方法.