SOX9在胆道闭锁肝脏中的表达及与肝纤维化关系的研究

• 作者: 王皓洁 赵金凤 苟庆云 郑启鹏 陈灵芝 张聪 葛亮 马慧 胡晓丽 林书祥 詹江华
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 胆道闭锁 肝纤维化 SOX9转录因子
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 胆道闭锁专题
• 页码范围: 512-518
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421158-20201119-00708

摘要

目的:通过研究SOX9在胆道闭锁(biliary atresia，BA)肝脏中的表达及与肝纤维化之间关系，探索其在肝纤维化进程中的作用。方法:选取天津市儿童医院2018年12月至2020年7月普外科收治手术患儿40例，其中胆道闭锁30例(BA组)；非胆道闭锁10例(non-BA组)，包括先天性胆总管扩张症(congenital biliary dilatation，CBD)5例及胆道发育不良(biliary hypoplasia，BH)5例。术中取肝活检组织标本行HE染色，据日本Ohkuma's肝纤维化分级标准进行肝组织分级后，按照纤维化程度分两组：轻度、重度。通过免疫组织化学染色及荧光染色观察肝组织SOX9的表达并进行统计学分析，利用qRT-PCR检测肝组织SOX9 mRNA的表达并进行统计学分析，先行Kolmogorov-Smirnov正态性检验，符合正态分布的计量资料采用Mean±SD表示，组间比较采用 t检验；非正态分布计量资料采用中位数及四分位数[M( P25， P75)]表示，则进行Mann-Whitney U检验， P<0.05，为差异有统计学意义。利用体外细胞实验分析肝星状细胞SOX9的表达。 结果:①免疫组织化学染色及荧光染色示：SOX9表达于BA肝细胞、胆管细胞的细胞核内，激活的肝星状细胞细胞核呈SOX9阳性。②免疫组化半定量检测示：与non-BA组相比，SOX9在BA组表达明显增高，为(0.126 6±0.047 2)比(0.069 5±0.033 1)， t＝3.531， P<0.01；SOX9在重度纤维化组表达高于轻度纤维化组，为(0.158 6±0.033 9)比(0.094 7±0.035 6)， t＝-5.048， P<0.01。③qRT-PCR定量分析检测示：与non-BA组相比，BA组SOX9的mRNA表达显著升高，为(0.031 3±0.024 5)ng/ml比(0.005 9±0.005 0)ng/ml， t＝4.34， P<0.01；重度纤维化组SOX9 mRNA的表达显著高于轻度纤维化组[0.040 9 ng/ml(0.030 5，0.054 9)比0.013 9 ng/ml(0.003 0，0.031 2)， P＝0.001]；LX-2激活态中ACTA2及SOX9的mRNA表达均高于LX-2静止态，为(16.023 6±1.116 3)比(6.810 5±1.005 9)， tACTA2＝-10.619 8，P ACTA2<0.01；(11.530 1±1.180 2)比(4.569 8±0.716 8)， tSOX9＝-14.954 4， PSOX9<0.01。 结论:SOX9在BA肝组织中高表达且随肝纤维化程度加重而增加，与肝纤维化进程相关。