黑色素瘤相关抗原MAGEA1的定位及其相互作用蛋白质的鉴定

• 作者: 李瑜颖 钟子琳 陈建军
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 关键词: 黑色素瘤相关抗原家族A1 亚细胞定位 线粒体 E3泛素连接酶TRIM31 组蛋白去乙酰酶1
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research Papers
• 页码范围: 765-771
• 页数: 7页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2021.03.1565

摘要

黑色素瘤相关抗原家族A1蛋白(melanoma associated antigen family A1,MAGEA1)在生殖细胞和多种组织学来源的肿瘤中有表达,但其作用机制尚不清楚.本研究通过构建带Flag和GFP标签的MAGEA1真核表达重组质粒,将其转染至HeLa、HEK293T细胞内.利用Western印迹、免疫细胞荧光法、免疫共沉淀、细胞核蛋白质与细胞质蛋白质分离和线粒体提取等技术,检测其在细胞内的表达与定位以及与其他蛋白质的相互作用情况.免疫细胞化学和蛋白质印迹结果显示,过表达的MAGEA1主要定位于细胞质,并部分与线粒体共定位.通过免疫共沉淀验证了MAGEA1与TRIM31、SNW1、HDAC1之间存在相互作用,并且发现MAGEA1可能主要与位于细胞质中的HDAC1相互作用.以上研究表明,MAGEA1可能参与不同的细胞内调节途径,部分与线粒体共定位;与TRIM31、SNW1、HDAC1相互作用,且可能主要与位于细胞质中的HDAC1蛋白相互作用,推测其可能参与到蛋白质泛素化和Notch信号通路.本研究的结果为后续深入研究MAGEA1的作用机制奠定了实验基础.