代谢工程优化大肠杆菌高效合成L-苯丙氨酸

• 作者: 门佳轩 熊博 郝亚男 李旋 刘益宁 谢希贤
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: L-苯丙氨酸 大肠杆菌 规律间隔成簇短回文重复序列/Cas9 发酵生产
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 114-120
• 页数: 7页
• 分类号: TQ922
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20191020-200

摘要

为获得1 株稳定高产的L-苯丙氨酸工程菌株,利用规律间隔成簇短回文重复序列/Cas9技术,在大肠杆菌W3110中引入己解除反馈抑制的分支酸变位酶/预苯酸脱水酶PheA,随后利用不同强度的启动子对莽草酸途径中各反应酶进行调控,并通过摇瓶发酵确定了莽草酸途径各步反应酶的最适表达强度,最后通过增加前体物磷酸烯醇式丙酮酸供应,获得了 1株性能最佳的L-苯丙氨酸工程菌株PHE12.利用该菌株进行摇瓶发酵24 h,L-苯丙氨酸产量达20.5g/L.利用发酵罐分批补料发酵48 h后,L-苯丙氨酸产量达81.8g/L,与目前文献报道的最高产量相比产量提高了 12.2％,生产强度和糖酸转化率(葡萄糖计)分别为1.7 g/(L·h)和0.24g/g,工业前景良好.