微小RNA-195对结直肠癌细胞上皮-间质转化及侵袭的影响

• 作者: 刘宁 马洪芳 杨文浩
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 关键词: 结直肠癌 微小RNA-195 上皮-间质转化 侵袭
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究|Basic Medicine Research
• 页码范围: 794-800
• 页数: 7页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3639/j.issn.1009-5551.2021.07.006

摘要

目的 研究微小RNA(miR)-195通过Toll样受体4/核转录因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路对结直肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)及侵袭的影响,并探讨相关机制.方法 取对数期结直肠癌HCT116细胞,随机分为Control组(不处理)、NC组(转染NC mimic)、miR-195 mimic组(转染miR-195 mimic)、miR-195 mimic+脂多糖(LPS)(TLR4/NF-κB信号通路激活剂)组(转染miR-195 mimic,并加入LPS 100μg/mL).实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-195表达量;Transwell实验、划痕实验观察侵袭、迁移能力;Western blot法检测细胞波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达量;双荧光素酶实验验证miR-195与TLR4的靶向关系;Western blot法检测细胞TLR4、髓样细胞分化因子88(MyD88)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65蛋白表达量.结果 与Control组、NC组比较,miR-195 mimic组miR-195表达量、E-cadherin蛋白表达量显著升高,每个视野平均穿膜细胞数量显著减少,迁移率、Vimentin蛋白表达量显著降低(P<0.05);与miR-195 mimic组比较,miR-195 mimic+LPS组miR-195表达量、E-cadherin蛋白表达量降低,每个视野平均穿膜细胞数量显著增加,迁移率显著升高,Vimentin蛋白表达量显著升高(P<0.05);双荧光素酶结果显示,与仅转染pmir-RB-REPORTTM的293T细胞比较,共转染pmir-RB-REPORTTM-TLR4-3'-UTR与miR-195 mimic的293T细胞荧光素酶活性值显著升高(P<0.05);与Control组、NC组比较,miR-195 mimic组TLR4、MyD88蛋白表达量、p-NF-κB p65/NF-κB p65显著降低(P<0.05);与miR-195 mimic组比较,miR-195 mimic+LPS组TLR4、MyD88蛋白表达量、p-NF-κB p65/NF-κB p65显著升高(P<0.05).结论 过表达miR-195可通过靶向抑制TLR4/NF-κB信号通路,发挥对结直肠癌细胞EMT及侵袭的抑制作用.