胰岛素样生长因子2通过磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路调控人卵巢颗粒细胞增殖的机制

• 作者: 丁祥云 马永臻 尹华伟 段君君 李真 庄园 张琳
• 来源期刊: 解剖学报
• 关键词: 胰岛素样生长因子2 磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路 人卵巢颗粒细胞 免疫印迹法
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学|Cell and Molecules Biology
• 页码范围: 567-573
• 页数: 7页
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2021.04.011

摘要

目的 检测胰岛素样生长因子2(IGF2)对人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)增殖的调控作用及作用机制.方法 将体外培养的KGN细胞,分不同浓度IGF2处理组(对照组和25 μg/L、50 μg/L、100μg/L IGF2组)和磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路干预组(以LY294002干预处理将细胞分对照组、100μg/L IGF2组、LY294002组和IGF2+LY294002组).采用MTS和5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)法检测IGF2对KGN细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞培养液上清中雌激素、孕激素的含量,Western blotting法检测各组胰岛素样生长因子受体1(IGF1R)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)及CYP19A1蛋白表达.结果 随着IGF2的浓度梯度增高,KGN细胞的增殖率及雌激素、孕激素的分泌量逐渐升高,以100 μg/L IGF2处理组的细胞增殖率和激素水平最高(P＜0.01),而抑制PI3K/Akt信号通路,细胞增殖率和激素的分泌量均明显降低(P＜0.01);Western blotting结果显示,IGF1R、p-Akt及CYP19A1蛋白表达水平随着IGF2的浓度梯度逐渐升高(P＜0.05),而干预PI3K/Akt信号通路可影响上述蛋白的表达,与对照组相比,IGF2组和IGF2+LY294002组IGF1R及p-Akt蛋白表达均明显升高(P＜0.01),CYP19A1在IGF2组明显升高(P＜0.01),LY294002组p-Akt及CYP19A1蛋白明显降低(P＜0.05),IGF1R的表达差异无统计学意义.与IGF2组相比,IGF2+LY294002组p-Akt及CYP19A1蛋白表达降低(P＜0.01),IGF1R的表达差异无统计学意义,LY294002组p-Akt及CYP19A1蛋白表达量均显著降低(P＜0.01).结论 IGF2可能由IGF1R介导通过PI3K/Akt信号通路促进人卵巢颗粒细胞的增殖及分泌功能.