千斤拔混合粉对大鼠骨结构功能的改善作用

• 作者: 郭橹橹 谢宏晨 刘力进 唐萌萌 黄毅娜
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 关键词: 千斤拔 去势大鼠 骨质疏松 成骨细胞 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究|Experiment
• 页码范围: 294-302
• 页数: 9页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2021.20290

摘要

[背景]千斤拔作为常用中药含有丰富的异黄酮类化合物,有抗骨质疏松的潜力.然而目前对于含千斤拔成分的骨质疏松保健食品的研发甚少.[目的]研究一款含千斤拔的新型保健食品改善骨质疏松的效果及机制探讨.[方法]根据《食品安全国家标准急性经口毒性试验》的限量法进行千斤拔混合配方粉急性经口毒性试验;采用去势成年雌鼠建立骨质疏松模型,SPF级成年雌性未孕SD大鼠32只,按体重分层后随机均分为假手术组和模型组(细分为模型对照组、模型+千斤拔混合粉组和模型+面粉混合粉组).模型对照组给予水,其余两模型组每日按10 mL·kg-1(按体重计)经口灌胃给予相应剂量的配方受试物13周.实验结束时测大鼠股骨密度、股骨干重和骨钙含量,并对股骨进行病理学检查,测骨皮质厚度.体外培养乳鼠颅骨成骨细胞,探究千斤拔提取物对其增殖分化的影响:超声波辅助提取千斤拔,以AB-8型大孔树脂进行纯化,分别得到不同梯度甲醇洗脱组分;在最佳洗脱梯度条件下,以浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g·L-1千斤拔提取液培养24、48、72 h,另设0.4 g·L-1淫羊藿苷阳性对照组和0.1％DMSO溶剂对照组.用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)和碱性磷酸酶(ALP)测试盒(酶标仪法)分别测定成骨细胞的增殖率和ALP活性.[结果]急性经口毒性试验表明千斤拔混合配方粉属实际无毒级别.干预13周后,与模型对照组相比,千斤拔混合粉组和面粉混合粉组的骨密度、骨皮质厚度值均升高,差异有统计学意义(P<0.05),且千斤拔混合粉组的骨皮质厚度[(376.01±51.52)μm]较面粉混合粉组[(302.87±64.83)μm]升高(P<0.05).病理组织结果显示:与模型对照组相比,千斤拔混合粉组骨小梁数目明显增多,分离度变小,骨小梁结构变紧密,且千斤拔混合粉组上述结果也明显优于面粉混合粉组.根据不同甲醇洗脱梯度下的成骨细胞ALP活性和总黄酮含量,选择60％作为千斤拔提取物最佳甲醇洗脱梯度.在此梯度下,CCK-8和ALP活性测定试验结果显示:与溶剂对照相比,对成骨细胞分别作用24 h、48 h、72 h后,不同浓度千斤拔提取物尽管对细胞有抑制增殖作用,但均具有增高ALP活性的作用(P<0.05).[结论] 含千斤拔的保健品配方具有一定的改善骨功能的作用,其机制可能与促进成骨细胞的分化有关.