沉默Bax Inhibitor-1基因对子宫肌瘤细胞凋亡的影响及机制研究

• 作者: 苗润燕 刘华 田源
• 来源期刊: 中国计划生育和妇产科
• 关键词: 子宫平滑肌瘤 Bax抑制因子1(BI-1) 线粒体膜电位 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 论著与临床研究|ORIGINAL ARTICLE AND CLINICAL RESEARCH
• 页码范围: 70-75
• 页数: 6页
• 分类号: R711.74
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4020.2021.06.16

摘要

目的 在子宫平滑肌瘤中探究Bax抑制因子1(Bax inhibitor-1,BI-1)的表达及其对子宫平滑肌瘤细胞的作用与相关机制.方法 应用RT-PCR及Western blot实验检测20对子宫平滑肌瘤组织样本与瘤旁组织中BI-1的mRNA及蛋白表达;分离培养原代子宫平滑肌瘤细胞并应用α-Actin免疫细胞染色进行鉴定;应用siRNA技术将靶向沉默BI-1的si-BI-1及阴性对照序列si-NC转染入上述分离培养的子宫平滑肌瘤细胞中,并将细胞分为3组,Control组、si-BI-1组和si-NC组;分别应用CCK-8、Annexin V-FITC及JC-1与流式细胞术分析沉默BI-1对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡、线粒体膜电位及细胞中Ca2+浓度的影响,最后应用Western blot实验检测沉默BI-1对子宫肌瘤细胞中Cyt-C及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Cleaved caspase-3表达的影响.结果 与瘤旁组织相比,BI-1在子宫肌瘤中的mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.05);成功分离培养纯度较高的原代子宫肌瘤细胞;与Control组细胞相比,沉默BI-1基因表达不影响子宫平滑肌瘤细胞的增殖能力(P>0.05),但显著促进si-BI-1组细胞的凋亡率(P<0.05),并促进细胞线粒体膜电位降低且胞质及线粒体中Ca2+浓度的增加(P<0.05);Western blot实验检测结果显示,与Control组细胞相比,沉默BI-1基因表达使si-BI-1组细胞中的Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),Bax、Cleaved caspase-3及Cyt-C蛋白表达明显增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05).结论 实验发现BI-1在子宫肌瘤组织中的表达显著增加,沉默子宫肌瘤细胞中BI-1基因可能通过改变Bcl-2/Bax比值,促进胞质及线粒体中Ca2+浓度的增加,从而引起线粒体膜电位的下降及损伤所诱导细胞发生凋亡.