miR-3074-5p及其靶基因 p27在子痫前期胎盘组织中的异常表达

• 作者: 顾艳 乔磊 范卓然 顾文文 盛红娜 王建梅 华绍芳 张璇
• 来源期刊: 中华生殖与避孕杂志
• 关键词: miR-3074-5p p27 子痫前期 胎盘 滋养层细胞
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 812-821
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn101441-20200825-00460

摘要

目的:观察miR-3074-5p及其靶基因 p27在子痫前期胎盘组织中的表达情况，初步探讨miR-3074-5p/ p27分子途径在子痫前期病理过程中的作用。 方法:收集2017年9月至2018年3月期间在天津医科大学第二医院产科行剖宫产手术的子痫前期患者（子痫前期组，16例）和相同孕周非子痫前期的剖宫产产妇（对照组，9例）的胎盘组织，通过实时定量PCR、免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）和Western blotting检测，比较两组胎盘组织中miR-3074-5p以及p27、细胞周期蛋白D1（cyclin D1，CCND1）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin dependent kinase 2，CDK2）等蛋白的表达水平。应用双荧光素酶基因报告系统，验证miR-3074-5p对 p27 mRNA的靶向抑制作用；通过RNA干扰技术，敲低人绒毛外滋养细胞系HTR-8/SVneo中p27蛋白的表达水平，观察p27表达下调对细胞生理活性的影响。 结果:与对照组相比，子痫前期组胎盘组织中miR-3074-5p（ P=0.034）与CCND1蛋白的表达量都显著下调（ P=0.031），而p27蛋白的表达量则显著上调（ P=0.010）；IHC结果显示，p27和CCND1蛋白主要表达于合体滋养层细胞中。双荧光素酶报告系统检测结果证实，miR-3074-5p能与 p27 mRNA的3’UTR序列结合而抑制其表达；敲低HTR-8/SVneo细胞中 p27的表达水平后，细胞的增殖（ P=0.014）和侵袭（ P=0.045）活性都显著增强。 结论:miR-3074-5p可能通过直接靶向抑制 p27的表达而参与调控人绒毛外滋养层细胞的生理活性，进而影响胎盘发育及功能；胎盘组织中miR-3074-5p的异常低表达可能通过诱导 p27的表达而参与子痫前期的病理过程。