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长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用
长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用
作者:
卞龙艳
庄敏
李姝
戴颖
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本
miR-22
凋亡
p38丝裂原活化蛋白激酶
人晶状体上皮细胞
摘要:
目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)-心肌梗死相关转录本(myocardial infarction-associated transcript,MIAT)对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用.方法 体外培养人晶状体上皮细胞株HLE-B3,分为空白对照组、H2O2组、阴性对照组(转染空质粒)、si-MIAT组(慢病毒感染siMIAT质粒)、si-MIAT+ miR-22 inhibitor组(慢病毒感染siMIAT质粒+脂质体转染miR-22 inhibitor),除空白对照组外,各组细胞均用100μmol·L-H2O2培养12 h.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定各组细胞中lncRNA-MIAT的相对表达水平.采用CCK-8法检测细胞存活率和凋亡率.流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.双荧光素酶和RNA结合蛋白免疫共沉淀实验分析lncRNA-MIAT和miR-22以及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的靶向关系.Western blot检测各组细胞中p38MAPK、p-p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK蛋白表达.结果 与空白对照组相比,H2O2组可诱导HLE-B3细胞lncRNA-MIAT表达上调,miR-22表达降低(均为P<0.05).与空白对照组和阴性对照组相比,si-MIAT组细胞miR-22相对表达量升高,而与si-MIAT组相比,si-MIAT+ miR-22 inhibitor组细胞miR-22相对表达量降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与H2O2组相比,si-MIAT+H2O2组细胞存活率升高,细胞凋亡率和MDA、ROS含量降低,BAX蛋白、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值、p-JNK/JNK比值均降低(均为P<0.05).经双荧光素酶报告基因分析,lncRNA-MIAT靶向结合miR-22,且p38是miR-22的下游靶基因.与si-MIAT+ H2O2组相比,si-MIAT+ miR-22 inhibitgr+ H2O2组细胞存活率降低,细胞凋亡率和MDA、ROS含量增加,BAX蛋白、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值、p-JNK/JNK比值均增加(均为P <0.05).结论 lncRNA-MIAT具有海绵吸附miR-22的作用,敲低lncRNA-MIAT可通过上调miR-22表达进而抑制p38 MAPK/JNK通路活化,抑制H2O2诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激反应.
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篇名
长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用
来源期刊
眼科新进展
学科
关键词
长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本
miR-22
凋亡
p38丝裂原活化蛋白激酶
人晶状体上皮细胞
年,卷(期)
2021,(4)
所属期刊栏目
实验研究|EXPERIMENTAL STUDIES
研究方向
页码范围
317-322
页数
6页
分类号
R776
字数
语种
中文
DOI
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miR-22
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p38丝裂原活化蛋白激酶
人晶状体上皮细胞
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研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
眼科新进展
主办单位:
新乡医学院
出版周期:
月刊
ISSN:
1003-5141
CN:
41-1105/R
开本:
大16开
出版地:
河南省新乡市新乡医学院
邮发代号:
36-42
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
6987
总下载数(次)
11
总被引数(次)
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