原子力显微镜观测小分子化合物J2对原代培养的大鼠角膜上皮细胞膜表面超微结构的影响

• 作者: 宋静 黄一飞 郭惠玲 王大江
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 关键词: 角膜 上皮细胞 显微镜检查，原子力 B7-1抗原 移植物排斥 免疫抑制剂
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 608-613
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112142-20201218-00828

摘要

目的:探讨小分子化合物J2对体外培养的大鼠角膜上皮细胞膜表面超微结构的影响。方法:实验研究。取SD大鼠原代培养的角膜上皮细胞进行研究。采用密度梯度离心分离法获取大鼠单个核细胞（MNC），将MNC加入角膜上皮细胞共培养，再用小分子化合物J2处理作为实验组，未进行小分子化合物J2处理的MNC及角膜上皮细胞作为对照组，空白对照组仅为角膜上皮细胞。应用流式细胞术检测角膜上皮细胞CD80的表达。采用原子力显微镜（AFM）观测角膜上皮细胞膜表面形态学参数，包括平均粗糙度（Ra）、均方根粗糙度（Rq）、平均低谷高度（Rvm）及波峰至波谷的粗糙度（Rt）。多个样本均数间的总体比较采用单因素方差分析，组间的多重比较采用LSD- t检验。 结果:实验组、对照组及空白对照组角膜上皮细胞CD80的表达量分别为1.944±0.237、3.128±0.175及1.082±0.120，组间比较差异有统计学意义（ F=156.31， P<0.01）。AFM观测角膜上皮细胞膜表面超微结构：实验组、对照组及空白对照组Ra值分别为86.75±12.60、120.23±12.11、61.94±10.62，组间差异有统计学意义（ F=306.92， P<0.01）；3个组Rq值分别为102.53±9.45、138.30±10.13、91.96±7.25，组间差异有统计学意义（ F=361.85， P<0.01）；3个组Rvm值分别为-42.21±14.22、-67.36±10.89、-32.18±19.01，组间差异有统计学意义（ F=72.22， P<0.01）；3个组Rt值分别为437.32±15.66、495.32±13.96、339.92±11.22，组间差异有统计学意义（ F=1634.26， P<0.01）；3个组两两比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:经MNC活化的SD大鼠角膜上皮细胞呈CD80高表达，在小分子化合物J2作用后CD80表达减少；应用AFM可以观测到SD大鼠角膜上皮细胞膜表面超微结构经MNC活化后更加粗糙，颗粒状突起明显增加，在小分子化合物J2作用后超微结构的改变有所减轻。 （中华眼科杂志，2021，57：608-613）