基于PI3K/HIF-1α通路探讨白芍总苷联合来氟米特对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞血管新生的影响

• 作者: 黎小琼 王云秀 曹楠楠 陈颖婷
• 来源期刊: 世界中西医结合杂志
• 关键词: 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 白芍总苷 血管新生 磷脂酰肌醇3-激酶 缺氧诱导因子-1α
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1031-1035,1043
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13935/j.cnki.sjzx.210611

摘要

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)通路探讨白芍总苷(TGP)联合来氟米特(LF)对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)血管新生的影响.方法 将体外培养的HFLS-RA细胞分为空白组、LF组(10 mg/L LF)、TGP低剂量组(3 mg/L TGP)、TGP中剂量组(6 mg/L TGP)、TGP高剂量组(12 mg/L TGP)、联合组(6 mg/L TGP+10 mg/L LF),每组3个复孔,每孔加入含相应终浓度的含药培养基,空白组加入等量H-DMEM完全培养基.MTT法测定各组HFLS-RA细胞增殖抑制率;ELISA法检测各组细胞上清液中白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平;采用各组干预后的条件培养基体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察新生血管腔个数;采用RT-qPCR法和Western blot法检测各组PI3K、蛋白激酶B(AKT)、HIF-1αmRNA及PI3K、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、HIF-1α蛋白表达.结果 与LF组比较,TGP中剂量组、TGP高剂量组及联合组对HFLS-RA细胞增殖抑制率均升高,其中联合组对HFLS-RA细胞增殖抑制率最高,差异有统计学意义(P<0.05).与空白组比较,LF组、TGP低剂量组、TGP中剂量组、TGP高剂量组及联合组HFLS-RA细胞上清液中IL-1β、IL-8、VEGF水平均降低,其中联合组最低,差异有统计学意义(P<0.05).与空白组比较,LF组、TGP低剂量组、TGP中剂量组、TGP高剂量组及联合组干预后的条件培养基诱导HUVECs新生血管腔个数均减少,其中联合组最少,差异有统计学意义(P<0.05).与空白组比较,LF组、TGP低剂量组、TGP中剂量组、TGP高剂量组及联合组HFLS-RA细胞中PI3K、HIF-1αmRNA及PI3K、HIF-1α、p-AKT蛋白相对表达量均降低,其中联合组最低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGP可有效抑制HFLS-RA血管新生,且联合LF效果更佳,其机制可能通过抑制PI3 K/HIF-1α信号通路发挥调控作用.