鹅MyoG基因启动子活性及转录调控元件分析

• 作者: 陈哲 陈蓉 闫乐艳 陈佳彬 于建宁
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 关键词: 鹅 MyoG基因 启动子活性 点突变 转录调控
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 遗传育种|ANIMAL GENETICS AND BREEDING
• 页码范围: 1869-1879
• 页数: 11页
• 分类号: S835.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2021.07.010

摘要

旨在分析鹅MyoG基因启动子活性区域和转录因子,探究该基因的转录调控机制.本研究首先通过PCR扩增泰州鹅MyoG基因5'侧翼区序列1 245 bp并对其进行测序和生物信息学分析,其次,构建4个不同缺失片段的双荧光素酶报告载体,转染C2C12细胞系.进一步利用在线软件预测核心启动子区关键转录因子,对转录因子结合位点HNF4(-521～-503 bp)、USF(—379～-370 bp)和E2(-296～-281 bp)进行定点突变并构建突变报告基因载体,在C2C12细胞系内初步鉴定MyoG基因核心转录调控因子.最后,采集70日龄泰州鹅胸肌、腿肌、心、肝、脾、肺、肾和下丘脑组织样,利用荧光定量PCR检测MyoG基因和核心转录调控因子的组织表达谱.结果表明,扩增得到的鹅MyoG基因5'侧翼区序列包含启动子元件;利用双荧光素酶报告载体检测到鹅MyoG基因启动子区-624～-154 bp区域存在关键顺式调控元件;结合定点突变技术初步鉴定USF是鹅MyoG基因核心转录调控元件.组织表达谱研究进一步表明,MyoG和USF基因在鹅8个不同组织中均有表达,且在胸肌、腿肌和心组织中共同高表达(P＜0.01).鹅MyoG基因5'侧翼区具有启动子转录活性,-624～+37 bp是核心启动子区,USF是MyoG核心转录调控因子.试验结果为探究MyoG基因在鹅肌肉发育过程的调控机制提供理论依据.