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NORAD在高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡中的作用及机制
NORAD在高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡中的作用及机制
作者:
刘强
姚丽
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
糖尿病肾病
DNA损伤激活的非编码RNA
微RNA-520h
Toll样受体4
摘要:
目的:探讨DNA损伤激活的非编码RNA(NORAD)在高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡中的作用及机制。方法:根据培养基中葡萄糖浓度将小鼠肾小球系膜细胞SV40-MES-13分为高糖组及低糖组,处理24 h后转染NORAD小干扰RNA(si-NORAD)及Toll样受体4(TLR4)小干扰RNA(si-TLR4),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NORAD及TLR4的表达。在SV40-MES-13细胞中分别转染NORAD、TLR4过表达质粒及小干扰RNA。Cell Counting Kit-8(CCK-8)、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色及流式细胞术检测细胞增殖和凋亡结果;共转染NORAD和miR-520h模拟剂,TLR4和miR-520h模拟剂后检测荧光素酶强度及三者表达情况;共转染si-NORAD和miR-520h抑制剂、TLR4过表达质粒和miR-520h模拟物以及共转染si-TLR4和miR-520h抑制剂后检测三者水平及细胞增殖水平来验证三者的调节关系。结果:高糖处理小鼠系膜细胞SV40-MES-13后,NORAD(1.65±0.08比1.00±0.06, P=0.003)及TLR4(1.96±0.09比1.01±0.07, P=0.001)的表达均升高。NORAD及TLR4过表达后细胞增殖加快(1.34±0.04比0.85±0.04, P=0.001;1.33±0.02比0.82±0.03, P<0.001),细胞凋亡减少(0.45±0.03比0.94±0.06, P=0.001;0.51±0.05比0.99±0.03, P=0.001)。双荧光素酶报告基因结果显示,miR-520h能与NORAD及TLR4结合;NORAD与miR-520h表达相互影响,miR-520h模拟物可减少TLR4表达。与单独转染si-NORAD相比,共转染si-NORAD及miR-520h抑制剂时TLR4相对表达量升高(0.74±0.03比0.55±0.03, P=0.014);与单独转染miR-520h模拟物相比,共转染miR-520h模拟剂及TLR4过表达质粒后细胞增殖更快(0.73±0.01比0.61±0.02, P=0.007);与单独转染miR-520h抑制剂相比,共转染miR-520h抑制剂及si-TLR4后细胞增殖减少(1.31±0.04比1.55±0.04, P=0.013)。 结论:NORAD可结合miR-520h调节TLR4促进高糖诱导系膜细胞增殖及抑制凋亡。
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NORAD在高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡中的作用及机制
来源期刊
中华医学杂志
学科
关键词
糖尿病肾病
DNA损伤激活的非编码RNA
微RNA-520h
Toll样受体4
年,卷(期)
2021,(10)
所属期刊栏目
糖尿病肾病
研究方向
页码范围
732-736
页数
5页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.cn112137-20200917-02664
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DNA损伤激活的非编码RNA
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研究起点
研究来源
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研究去脉
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期刊影响力
中华医学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
周刊
ISSN:
0376-2491
CN:
11-2137/R
开本:
大16开
出版地:
北京市西城区宣武门东河沿街69号
邮发代号:
2-588
创刊时间:
1915
语种:
chi
出版文献量(篇)
21130
总下载数(次)
49
总被引数(次)
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