藁本内酯对脂多糖诱导的肺上皮细胞损伤的保护作用及其机制

• 作者: 张小芳 唐凤鸣
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 关键词: 藁本内酯 肺上皮细胞 脂多糖 细胞损伤 自噬
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 治疗制剂
• 页码范围: 824-830
• 页数: 7页
• 分类号: R915
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨藁本内酯(ligustilide,LIG)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的肺上皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法 将人肺上皮细胞BEAS-2B分为对照组、LPS组和LPS+LIG组,分别加入空白溶剂或对应药物培养,采用CCK-8法检测LIG对LPS诱导的BEAS-2B细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡;透射电镜观察细胞显微形态;转染GFP-LC3荧光质粒后,激光共聚焦显微镜观察免疫荧光;Western blot法检测细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达水平.在LPS和LIG作用的细胞中加入自噬抑制剂羟氯喹(hydroxychloroquine,HCQ)或3-甲基嘌呤(3-methylpurine,3-MA),CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况.结果 LPS呈剂量依赖性抑制BEAS-2B细胞增殖,细胞凋亡率显著上升,LIG可有效缓解LPS诱导的细胞凋亡.LPS处理的细胞在透射电镜下可观察到线粒体形态异常,LIG+LPS组细胞观察到自噬空泡数量增加和线粒体与自噬空泡融合的现 象.GFP-LC3质粒转染BEAS-2B细胞后,荧光显微镜下可见LPS组GFP聚集荧光点较对照组明显减少,加入LIG后,GFP聚集荧光点显著增加.LPS处理后,细胞凋亡相关蛋白水平上升,自噬相关蛋白水平下降,而加入LIG后,可部分逆转上述结果.加入自噬抑制剂3-MA或HCQ后,部分缓解了 LIG对LPS诱导的BEAS-2B细胞损伤的保护作用.结论 LIG可能通过促进BEAS-2B细胞的保护性自噬,减轻LPS诱导的肺上皮细胞损伤.