长链非编码RNA RP11-288L9.1在系统性红斑狼疮中的作用及其机制研究

• 作者: 赵承磊 赵兴旺 郭俊恺 王娟 张敏 张恋 游弋
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 关键词: 系统性红斑狼疮 长链非编码RNA RP11-288L9.1 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2021,（13）
• 所属期刊栏目: 基础医学|Basic Medicine
• 页码范围: 1204-1211
• 页数: 8页
• 分类号: R392.13|R392.32|R593.24
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202101010

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(long non-conding RNA,lncRNA) RP11-288L9.1在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中的作用及机制.方法 通过转录组测序方法(RNA-seq)筛选获得SLE患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)中差异表达的lncRNAs,采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术验证8例SLE患者和8例健康对照PBMCs中差异表达的lncRNA的表达水平.运用荧光原位杂交FISH技术检测RP11-288L9.1的细胞定位;设计并构建RP11-288L9.1敲低和过表达重组慢病毒,转染构建RP11-288L9.1敲低和过表达模型,采用qRT-PCR验证其转染效率.分别采用CCK-8和Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测慢病毒转染后巨噬细胞的增殖和凋亡能力,qRT-PCR检测敲低和高表达RP11-288L9.1后,巨噬细胞相关炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10、TGF-β1的表达.结果 通过转录组数据发现6个差异表达的lncRNA(P＜0.05).qRT-PCR验证RP11-288L9.1表达显著上调(P＜0.01).RP 11-288L9.1定位在巨噬细胞胞浆中.过表达RP11-288L9.1可促进巨噬细胞的凋亡并抑制增殖(P＜0.05),相关炎症因子IL-1β、IL-6表达显著上升,IL-4、IL-10、TGF-β1表达显著下降(P＜0.001);敲低RP11-288L9.1可促进巨噬细胞的增殖并抑制凋亡(P＜0.05),相关炎症因子IL-1β、IL-6表达显著下降(P＜0.01),IL-4、IL-10、TGF-β1表达显著上升(P＜0.01).结论 RP11-288L9.1在SLE患者PBMCs中高表达,并在巨噬细胞中通过影响炎症细胞因子的合成来调控免疫反应,这可能是SLE发病机制之一.