O、A、Asia1型口蹄疫病毒胶体金定量检测免疫层析方法的建立

• 作者: 李昕 孙燕燕 林密 陈夏辉 李峰松 包艳芳 杨光 蒋韬
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 关键词: 口蹄疫病毒 胶体金免疫层析 定量检测 146S
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医|PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
• 页码范围: 1042-1052
• 页数: 11页
• 分类号: S854.43
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2021.04.019

摘要

旨在建立口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)抗原血清型的快速分型和定量的检测方法,利用双抗体夹心法,将口蹄疫病毒的兔抗及豚鼠抗体作为标记胶体金与NC膜检测带的原料,分别制备出检测O、A、Asia 1血清型的3种层析试纸卡.通过对标定的抗原标准品146S检测,拟合出定量标准曲线.免疫层析方法的质量验证通过特异性、敏感性、重复性及与蔗糖密度梯度法(sucrose density gradient,SDG)的相关性进行评价.结果显示:建立的快速定量检测方法,3种血清型口蹄疫病毒间无交叉反应,同时与其他非口蹄疫病毒,如塞内卡病毒A型(SVA)、猪水疱病病毒(SVDV)、猪水疱性口炎病毒(VSV)无非特异反应;敏感性研究,对O、A、Asia 1型病毒的最低检出量分别为0.567、0.693、0.219μg·mL-1,拟合的3条标准曲线的线性相关系数R2>0.97,新建立方法与蔗糖密度梯度法检测结果的相关系数均>0.9,3种层析试纸卡的变异系数均小于10％.综上表明,建立的口蹄疫O、A、Asia1型病毒胶体金免疫层析定量检测试纸卡方法,可以用于口蹄疫病毒抗原快速鉴别、血清分型与146S定量检测.