miR-335-5p靶向程序化细胞死亡基因5对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响

• 作者: 张云青 李聪 王健 阳春华
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 骨关节炎 软骨细胞 miR-335-5p PDCD5 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（14）
• 所属期刊栏目: 软骨组织构建
• 页码范围: 2142-2147
• 页数: 6页
• 分类号: R446|R496|R318
• 语种: 中文

摘要

背景:研究发现,miR-335-5p在骨关节炎患者关节液中表达下调,其可能与骨关节炎的发生发展有关.目的:探讨miR-335-5p对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制.方法:分离培养人原代关节软骨细胞,以10 μg/L白细胞介素1β处理软骨细胞建立骨关节炎模型,并对处理后的软骨细胞进行转染和分组:对照组(常规培养基)、白细胞介素1β组、miR-NC组、miR-335-5p组、si-NC组、si-PDCD5组、miR-335-5p+pcDNA3.1组、miR-335-5p+pcDNA3.1-PDCD5组.培养至24,48和72 h采用MTT法和流式细胞术分别检测软骨细胞增殖和凋亡率;qRT-PCR检测软骨细胞miR-335-5p、程序化细胞死亡基因5(programmed cell death 5,PDCD5)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS-5)和基质金属蛋白酶13 mRNA的表达;Western blot实验检测软骨细胞中PDCD5、Cyclin D1、p21、Bax和Bcl-2蛋白的表达,双荧光素酶报告系统验证miR-335-5p与PDCD5的调控关系.研究方案的实施符合长沙市第一医院的相关伦理要求.结果 与结论:①与对照相比,白细胞介素1β可抑制软骨细胞增殖并促进细胞凋亡,抑制软骨细胞中miR-335-5p的表达;过表达miR-335-5p可促进白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖和抑制细胞凋亡;②miR-335-5p靶向负调控PDCD5的表达;③抑制PDCD5可促进白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖并抑制细胞凋亡;过表达PDCD5可逆转上调miR-335-5p对白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖和凋亡的作用;④结果说明,miR-335-5p通过靶向PDCD5促进细胞增殖和抑制细胞凋亡;miR-335-5p是骨关节炎潜在分子靶点.