超顺磁性聚乙烯亚胺纳米粒的制备及其骨肉瘤细胞、组织靶向转染效果观察

• 作者: 岑超德 张永 罗聪 陈韬 杨晓兰 曹永飞 刘承伟
• 来源期刊: 山东医药
• 关键词: 超顺磁性聚乙烯亚胺纳米粒 骨肉瘤 磁辅助转染技术 靶向基因治疗
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2021.08.004

摘要

目的 制备超顺磁性聚乙烯亚胺纳米粒(PEI-SPION-NPs),观察其作为靶向基因输送载体转染骨肉瘤细胞和组织的可行性.方法 通过脱水缩合反应将低分子量聚乙烯亚胺(PEI)修饰超顺磁性氧化铁纳米粒(SPION),制备PEI-SPION-NPs,对其分子结构、形态、粒径、饱和磁化强度、Zeta电位进行检测.将PEI-SPION-NPs与pDNA分别以不同比例混合,琼脂糖凝胶电泳观察PEI-SPION-NPs对pDNA的结合能力和保护作用.培养骨肉瘤MG-63细胞,分为实验1组(加入PEI-SPION-NPs/pDNA+磁场作用)、实验2组(加入PolyMag200/pDNA+磁场作用)、实验3组(加入PEI/pDNA)及对照组(加入pDNA),采用CCK-8法检测细胞存活率,倒置荧光显微镜观察转染情况,流式细胞仪测算转染率.制备裸鼠皮下骨肉瘤模型,分为Control组(皮下注射生理盐水)、PEI-SPION-NPs组(皮下注射PEI-SPI?ON-NPs/pGL3-Luc+磁场作用)、PEI-NPs组(皮下注射PEI/pGL3-Luc复合物+磁场作用),检测注射部位荧光强度,分别于造模第5、6、7、8、9周测量各组裸鼠体质量.结果 PEI-SPION-NPs的粒径低于PEI-SPION-NPs/pDNA;PEI-SPI?ON-NPs的饱和磁化强度为(21.5±1.6)emu/g,Zeta电位为(31.2±1.5)mV;PEI-SPION-NPs可结合并保护pDNA,并可成功转染MG-63细胞.实验1组和对照组细胞存活率高于实验2组和实验3组,实验1组转染效率高于实验3组和对照组(P均<0.05).PEI-SPION-NPs/pGL3-Luc与PEI-NPs/pGL3-Luc均可在裸鼠骨肉瘤组织中成功转染,PEI-SPI?ON-NPs组较PEI-NPs组荧光更为集中.造模第7周后PEI-SPION-NPs组裸鼠体质量高于PEI-NPs组(P均<0.01).结论 PEI-SPION-NPs是有效的非病毒基因载体,在磁场作用下可成功转染骨肉瘤细胞和组织.