靶向抑制PI3K对PDK-1/Akt信号通路调控成骨细胞分化的影响

• 作者: 陈巧玲 白亦光 别俊 杨蜜 张加勇
• 来源期刊: 西部医学
• 关键词: 转移性骨肿瘤 骨质疏松 骨破坏 成骨细胞 信号通路
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究|Basic Medical Research
• 页码范围: 1121-1125,1132
• 页数: 6页
• 分类号: R73-36
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2021.08.007

摘要

目的 通过观察磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002在成骨细胞分化过程中的影响,探讨PI3K通过调控PDK-1 /Akt信号通路对成骨细胞分化影响的分子机制.方法 采用体外培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC).通过CCK-8检测LY294002的最大安全浓度.对照组使用成骨细胞诱导培养基(OBM)处理BM-SC,干预组在OBM中添加LY294002.检测两组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性和细胞矿化能力,并分别采用Western-Blot和RT-PCR检测PDK-1/Akt信号通路及下游蛋白和转录因子基因的表达水平.结果 CCK-8结果提示,在3.2μM及以下浓度对BMSC的增殖没有影响;LY294002对成骨细胞分化的影响呈剂量依赖性(P＜0.05);干预组ALP阳性细胞和细胞外基质矿化较对照组明显减少(P＜0.05);Western-Blot检测结果显示,干预组p-PDK-1和p-Akt蛋白表达水平较对照组明显降低(P＜0.05);RT-PCR结果提示,干预组成骨细胞相关基因ALP和骨钙素(OCN)mRNA较对照组表达明显下降(P＜0.05).结论 靶向抑制PI3K可通过PDK-1 /Akt信号通路明显下调成骨细胞相关基因ALP和OCN的表达,并抑制成骨细胞的分化.