微小RNA-484靶向肝细胞核因子1A调控食管癌恶性细胞行为的分子机制

• 作者: 陈晓 汤金星 魏立
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 微小RNA 食管癌 增殖 迁移 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 680-683
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20200714-01243

摘要

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-484靶向肝细胞核因子1A(HNF1A)调控食管癌恶性细胞行为的分子机制。方法:选取河南省人民医院2017年6月至2019年1月手术切除的101例食管癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分析miR-484表达水平；采用慢病毒介导miRNA对照和miR-484在食管癌细胞系Eca109建立miRNA对照组和miR-484组过表达细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力；采用Transwell分析两组细胞迁移能力；采用流式细胞术分析两组细胞凋亡；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-484靶基因，采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析靶基因及迁移和凋亡相关蛋白表达。组间比较采用 t检验。 结果:癌旁组织miR-484表达水平(1.09±0.21)高于食管癌组织(0.31±0.17)，差异有统计学意义( t＝3.117， P<0.05)。miRNA对照组细胞miR-484表达水平(1.21±0.17)低于食管癌组织(3.96±0.35)，差异有统计学意义( t＝3.117， P<0.05)。miRNA对照组24 h和48 h吸光度( A)值(1.14±0.14、1.93±0.22)高于miR-484组细胞24 h和48 h A值(0.81±0.13、1.48±0.27)，差异有统计学意义( t＝2.910、2.791， P<0.05)，miRNA对照组细胞侵袭数量[(74.03±5.90)个]高于miR-484组细胞侵袭数量[(37.84±3.99)个]，差异有统计学意义( t＝4.805， P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(5.09±1.73)%]低于miR-484组细胞[(20.43±4.08)%]，差异有统计学意义( t＝3.719， P<0.05)。HNF1A是miR-484的靶基因。miRNA对照组细胞HNF1A和Caspase-3蛋白相对表达水平(1.89±0.25、0.63±0.12)低于miR-484组细胞(5.11±0.72、1.06±0.15)，差异有统计学意义( t＝6.109、2.091， P<0.05)。miRNA对照组细胞FAK蛋白相对表达水平(1.97±0.28)高于miR-484组细胞(1.48±0.21)，差异有统计学意义( t＝2.018， P<0.05)。 结论:miR-484在食管癌组织中呈低表达，通过影响靶蛋白HNF1A表达水平，参与食管癌细胞增殖、迁移和凋亡等生物学行为。