双孢蘑菇萎锈灵抗性基因定点突变的载体构建与遗传转化

• 作者: 卢园萍 肖婷婷 尚俊军 曾志恒 陈美元 鲍大鹏
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 食用菌 遗传转化 抗性标记 萎锈灵
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research papers
• 页码范围: 3256-3264
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.210347

摘要

为建立更为安全、有效的双孢蘑菇遗传转化体系,构建了双孢蘑菇琥珀酸脱氢酶的铁硫蛋白亚基Agsdi1突变(His突变为Leu)表达载体pAgsdi1,并通过农杆菌介导方法转化双孢蘑菇W192,经萎锈灵筛选以及PCR扩增和MnlⅠ酶切验证后获得了转化菌株.验证结果表明,点突变的铁硫蛋白亚基Agsdi1可以作为双孢蘑菇有效的抗性标记基因.因其并未引入新的外源基因,是一种比潮霉素抗性基因更为安全的筛选标记,将可用于双孢蘑菇等食用菌的遗传转化.