摘要:
目的 通过观察温和灸干预治疗后神经根型颈椎病模型大鼠内质网应激(ERS)介导的神经细胞自噬与凋亡因子表达的变化,探讨温和灸治疗神经根型颈椎病的疗效机制.方法 ①采用SPF级SD大鼠40只,依据随机数字表法平均分为:空白组、模型组、温和灸组、温和灸+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3MA)组每组各10只.②通过颈部神经根腋下鱼线卡压法构建CSR大鼠模型,采用大鼠步态障碍行为学评分进行模型评价.③造模成功后第3天,温和灸组取大椎穴进行温和灸干预,10 min/次,干预前予腹腔注射1 mL生理盐水;温和灸+3MA组干预方式同温和灸组,干预前予腹腔注射1 mL 3MA;模型组仅予腹腔注射1 mL生理盐水,不做温和灸干预,连续干预7天后处死,空白组正常饲养,不予任何处理,处死时间同其他3组.④干预前后采用YLS-3E型痛分析仪测量各组大鼠的机械性痛阈,干预结束后采用Western Blot检测Caspase-12、CHOP、GRP78的表达水平,电镜观察脊髓及神经根自噬小体及细胞超微结构.结果 ①造模后干预前,与空白组比较,模型组、温和灸组、温和灸+3MA组大鼠出现步态障碍,行为学评分升高(P<0.05),痛阈下降(P<0.05).干预后,与模型组比较,温和组、温和灸+3MA组痛阈明显上升(P<0.05),步态障碍改善,且温和灸组改善更为明显(P<0.05).②干预后,与模型组比较,温和灸组Caspase-12、CHOP、GRP78蛋白表达均显著下降(P<0.05),温和灸+3MA组GRP78蛋白表达显著下降(P<0.05),Caspase-12、CHOP蛋白表达有所下降,但差异不具有显著性(P>0.05);与温和灸+3MA组比较,温和灸组CHOP蛋白表达下降明显(P<0.05),Caspase-12、GRP78蛋白表达有所下降,但差异不具有显著性(P>0.05);电镜观察温和灸组自噬小体增多,且细胞超微结构较为完整.结论 温和灸治疗CSR具有良好的镇痛作用,其镇痛机制可能与激活神经细胞自噬,缓解内质网应激水平,抑制内质网应激凋亡因子表达有关.